■ 基本信息
別名: | pColdI |
啟動(dòng)子: | CSPA |
復制子: | pBR322 |
質(zhì)粒分類(lèi): | 大腸系列質(zhì)粒；大腸表達質(zhì)粒；pCold系列質(zhì)粒 |
質(zhì)粒大小: | 4407bp |
質(zhì)粒標簽: | N-His, N-Factor Xa |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | DH5a |
培養條件: | 37度，37℃，有氧，LB |
表達宿主: | BL21等大腸桿菌 |
誘導方式: | IPTG或乳糖及其類(lèi)似物 |
5'測序引物: | pCold-F（ACGCCATATCGCCGAAAGG） |
3'測序引物: | pCold-R（GGCAGGGATCTTAGATTCTG） |
功能簡(jiǎn)介:
| 大腸桿菌表達空載體 |
備注: | 冷啟動(dòng)表達質(zhì)粒 |
■ 質(zhì)粒屬性
質(zhì)粒宿主: | 大腸桿菌 |
質(zhì)粒用途: | 蛋白表達 |
片段類(lèi)型: | ORF
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片段物種: | 空載體
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原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
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熒光標記: |
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■ 質(zhì)粒簡(jiǎn)介
當培養的大腸桿菌的溫度充分降低，幾乎暫時(shí)停止生長(cháng)大部分的蛋白表達減少，而此時(shí)一組蛋白質(zhì)稱(chēng)為“冷休克蛋白”被專(zhuān)門(mén)誘導表達。冷休克表達載體，pCold I-IV，是利用冷休克基因CSPA啟動(dòng)子設計高效率蛋白質(zhì)表達載體。 CSPA的啟動(dòng)子的下游處，插入了lac操縱子，以便嚴格控制表達。此外，5'非翻譯區（5'UTR），翻譯增強元件（TEE），His標簽序列，Xa因子切割位點(diǎn)和多克隆位點(diǎn)（MCS）位于在CSPA啟動(dòng)子的下游的。由于該產(chǎn)品采用了大腸桿菌的啟動(dòng)子，大多數大腸桿菌菌株可被用作表達宿主。有四種類(lèi)型的pCold載體，他們的下列原件的位置稍有不同，TEE，His標簽序列和Factor XA酶切位點(diǎn)。
pColdI質(zhì)粒是利用冷休克基因CSPA啟動(dòng)子設計高效率蛋白質(zhì)表達載體。在啟動(dòng)子下游處，插入了lac操縱子，以便嚴格控制表達。此外，5’非翻譯區（5’UTR），翻譯增強元件（TEE）,His標簽序列，Xa因子切割位點(diǎn)和多克隆位點(diǎn)（MCS）位于CAPS啟動(dòng)子的下游。當培養溫度切換到低溫時(shí)，大腸桿菌暫時(shí)停止生長(cháng)，大部分的大腸桿菌蛋白質(zhì)表達減少，但是一類(lèi)稱(chēng)為冷休克蛋白的蛋白質(zhì)被特異性誘導表達。
■ 質(zhì)粒圖譜
■ 質(zhì)粒序列
質(zhì)粒序列請下載：
ZK1588 pCold I大腸表達質(zhì)粒.txt
