■ 基本信息
啟動(dòng)子: | CMV |
復制子: | pUC |
終止子: | WPRE，3’LTR |
質(zhì)粒分類(lèi): | 病毒系列，慢病毒克隆載體 |
質(zhì)粒大小: | 8204bp |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | Stbl3 |
培養條件: | 37度 |
表達宿主: | 哺乳細胞 |
誘導方式: | 無(wú)須誘導，瞬時(shí)表達 |
5'測序引物: | CMV-F：CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG |
3'測序引物: | 根據序列設計引物 |
■ 質(zhì)粒屬性
質(zhì)粒宿主: | 哺乳細胞,慢病毒 |
質(zhì)粒用途: | 蛋白表達 |
片段類(lèi)型: | ORF |
片段物種: | 空載體 |
原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
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熒光標記: | 綠色
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■ 質(zhì)粒簡(jiǎn)介
plvx-ires-zsgreen1是HIV-1，慢病毒表達載體，讓你在幾乎任何哺乳動(dòng)物細胞類(lèi)型的興趣和zsgreen1蛋白同時(shí)表達，包括原代細胞。zsgreen1是人類(lèi)密碼子優(yōu)化的變種的珊瑚礁Zoanthus屬綠色熒光蛋白，ZsGreen。向量表示的兩種蛋白雙順?lè )醋觤RNA的轉錄，使zsgreen1作為轉導效率的一個(gè)指標，用流式細胞儀選擇標記。
雙順?lè )醋拥霓D錄表達的組成性激活人類(lèi)巨細胞病毒立即早期啟動(dòng)子驅動(dòng)（CMV）位于上游的MCS。腦心肌炎病毒（EMCV）內部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)（IRES），位于MCS和zsgreen1之間，有利于在IRES / zsgreen1結內部起始位點(diǎn)zsgreen1帽獨立的翻譯。
plvx-ires-zsgreen1包含所有用于生產(chǎn)的必要的復制能力的慢病毒病毒處理的元素，以及元素來(lái)提高病毒滴度，外源基因的表達水平，和整體的向量函數。土撥鼠肝炎病毒轉錄后調節元件（WPRE）促進(jìn)RNA處理事件和增強病毒RNA核出口，導致增加病毒滴度包裝細胞。此外，載體包括Rev應答元件（RRE），從而進(jìn)一步增加病毒滴度提高拼接的病毒RNA轉運出細胞核。最后，plvx-ires-zsgreen1還包含一個(gè)中央聚嘌呤道/中央終止序列（CPPT / CTS）。在靶細胞感染過(guò)程中，該元素創(chuàng )建一個(gè)中央的DNA瓣，增加了病毒基因組的核導入，從而在改進(jìn)的矢量集成和更有效的轉導。載體還包含一個(gè)復制市局起源和大腸桿菌氨芐青霉素抗性基因（Ampr）在細菌繁殖和選擇。
■ 質(zhì)粒圖譜
■ 質(zhì)粒序列
質(zhì)粒序列請下載：
ZK758pLVX-IRES-ZsGreen1慢病毒表達質(zhì)粒.txt
