■ 基本信息
別名: | 細菌人工染色體質(zhì)粒單拷貝 |
復制子: | OriS |
質(zhì)粒大小: | 7507bp |
原核抗性: | Chl |
克隆菌株: | EPI400 |
培養條件: | 30度 |
備注: | 細菌人工染色體BAC質(zhì)粒 |
■ 質(zhì)粒屬性
質(zhì)粒宿主: | 大腸桿菌 |
質(zhì)粒用途: | 人工染色體 |
片段類(lèi)型: | cDNA
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片段物種: | 空載體
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原核抗性: | Chl |
真核抗性: |
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熒光標記: |
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■ 質(zhì)粒簡(jiǎn)介
隨著(zhù)基因組學(xué)時(shí)代的到來(lái),克隆并利用生物的重要基因,研究這些基因的結構、功能和進(jìn)化已成為遺傳學(xué)領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。生物體的許多重要性狀都涉及到復雜的生理生化反應,受多基因或基因簇的控制,與成百上萬(wàn)堿基的DNA片段相關(guān),此外,復雜基因組的物理作圖和基因的圖位克隆也涉及到大片段的研究,因此提高載體的容納量一直是克隆載體的重要發(fā)展方向之一。
目前比較理想的細菌人工染色體(Bacterial artificial chromosome,BAC)是指一種以F質(zhì)粒(F-plasmid)為基礎建構而成的細菌染色體克隆載體,命名為pBACs,其容量在50 - 300 kb之間,各種類(lèi)型的pBACs在大腸桿菌都呈單拷貝。
BAC是以大腸桿菌致育因子(F因子)為基礎的合成載體。F因子也稱(chēng)為F質(zhì)粒,是一種“性質(zhì)?!?,它可將宿主當然體基因轉移到另一宿主細胞。F因子在大腸桿菌中的復制受到嚴格控制而保持低拷貝,一般為每個(gè)細胞1-2個(gè)拷貝,其parB基因能夠排斥細胞中的外源性F質(zhì)粒,限制了細胞內質(zhì)粒分子間的重排,降低了重組BAC中外源DNA的重排水平和嵌合度。此外,F因子具有攜帶1M bp插入片段的潛能,這就使構具有大容量克隆能力的BAC載體成為可能。
BAC載體主要包括oriS,repE(控制F質(zhì)粒復制)和parA、parB(控制拷貝數)等元件。以BAC為基礎克隆的載體成嵌合體的頻率較低,轉化效率高,而且以環(huán)狀結構存在于細菌體內,易于分離純化,已被科學(xué)界廣泛接受。目前主要用于大片段基因組文庫的構建和大的基因簇(gene cluster)的相關(guān)研究,在各類(lèi)生物基因組計劃中發(fā)揮重要作用。
質(zhì)粒只保證關(guān)鍵序列正確,不保證表達效果。
■ 質(zhì)粒圖譜

■ 質(zhì)粒序列
質(zhì)粒序列可參考(具體以測序為準)下載:
ZK130pBeloBAC11細菌人工染色體質(zhì)粒(單拷貝).txt