■ 產(chǎn)品介紹
菌株為枯草芽孢桿菌,凍存管磁珠保存。
培養條件:胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA),非選擇性羊血瓊脂,PCA 或營(yíng)養瓊脂,36±1℃ 正常環(huán)境下培養24~48小時(shí)。 如需保存,則挑取單菌落接種至細菌保存培養基斜面,每月轉接1次,5代后應銷(xiāo)毀。
■ 產(chǎn)品保存原理
凍存管里的小瓷珠表面多孔,細菌可以很方便的吸附在上面。凍存管接種上細菌后,可放置于-20℃或-80℃環(huán)境中長(cháng)期保存(-20℃可保存一年,-80℃可保存二年)。當需要復蘇菌株時(shí),可以很方便的從凍存管中取出單個(gè)的小瓷珠,直接接種到合適的細菌培養基上(平板培養基或液體培養基)。
■ 菌株保存
1、瓷珠保存法:
1.1 使用前,用油性筆在每個(gè)凍存管上標記上細菌的名稱(chēng),每支凍存管只可接種一種細菌;
1.2 在無(wú)菌條件下,打開(kāi)凍存管的螺旋瓶蓋;
1.3 用接種環(huán)挑取18-24小時(shí)新鮮細菌純培養物,放入凍存液中。擰緊瓶蓋,來(lái)回顛倒使細菌乳化,配成大約3-4麥氏比濁度的菌懸液,此時(shí)細菌懸液會(huì )吸附在小瓷珠內外表面;
1.4 用無(wú)菌移液器將凍存管中的菌懸液盡量吸出。(吸出的菌懸液應放入消毒液中并隨后進(jìn)行高壓滅菌處理);
1.5 擰緊瓶蓋。記錄下接種細菌的詳細情況;
1.6 將接種完細菌的凍存管放在-20℃或-80℃冰箱中保存。
2、菌懸液保存法:
將復蘇好的試管的菌懸液,用滅菌好的甘油進(jìn)行封存后放置冰箱2~8℃進(jìn)行保存,保存時(shí)間為1個(gè)月。
3、斜面保存法:
將菌懸液用劃線(xiàn)方法進(jìn)行斜面的接種培養后,用滅菌后的甘油進(jìn)行保存放置冰箱2~8℃進(jìn)行保存,保存時(shí)間為1個(gè)月。
■ 菌株復蘇
1、取出凍存管并用力搖晃,使管內瓷珠分散。無(wú)菌條件下擰開(kāi)凍存管,用無(wú)菌的接種環(huán)(接種針)或鑷子取出小瓷珠,擰緊瓶蓋;
2、盡可能快地將凍存管放回原來(lái)的保存環(huán)境,溫度過(guò)多改變將減弱細菌的生存能力;
3、取出的小瓷珠可以直接放在平板培養基上劃線(xiàn)接種,或者直接置于適合的液體培養基中培養。
4、復蘇菌株時(shí)建議一次做3個(gè)磁珠,減少復活菌的次數,以免對細菌細胞造成影響,降低菌的活性。
■ 保存條件
1、未經(jīng)使用的凍存管可在室溫保存12個(gè)月;已經(jīng)接種的凍存管在-20℃可保存12個(gè)月或-80℃可保存24個(gè)月;盡量在三次內完成所有磁珠的接種,凍融多次影響菌株活性,且接種三次后冷藏保存,不可再冷凍保存;
2、在接種之前有如下情況產(chǎn)生,該凍存管不得使用:
a.瓶子有漏液情況發(fā)生;
b.凍存管內的凍存保護液混濁;
c.超過(guò)有效保存期。
3、小瓷珠一旦從凍存管中取出,不得再放回凍存管中;
4、當丟棄使用過(guò)的或部分使用過(guò)的凍存管時(shí),應注意生物危險的預防。
5、廢棄液經(jīng)高壓滅菌后(121℃,30分鐘)丟棄。
■ 備注
1、菌株來(lái)源中國醫學(xué)微生物菌種保藏管理中心的菌株干粉,菌株干粉默認為零代,對干粉菌株進(jìn)行復活為第一代菌株,第一代菌株進(jìn)行傳代并保存為菌株的第二代即現在的磁珠。
2、菌株為第二代,保質(zhì)期6個(gè)月,如發(fā)現污染或不活等現象,請1個(gè)月內聯(lián)系我公司。
3、菌株操作應在無(wú)菌條件下進(jìn)行,防止雜菌污染。
4、本方法僅供參考,視情況可以通過(guò)其他合理途徑進(jìn)行傳代和保存。
5、本公司出售的菌株僅用于科研、教學(xué)及衛生微生物檢驗質(zhì)量控制。