■ 產(chǎn)品介紹
INVSC1是釀酒酵母菌株,屬于真核細胞。一般的針對原核生物的抗生素例如卡那和氨芐對酵母是無(wú)效的,因此為了防止大腸桿菌等原核生物對酵母培養菌株污染,往往會(huì )在培養基中加入一些氨芐和卡那霉素的抗生素,來(lái)抑制細菌菌的污染和生長(cháng)。釀酒酵母適宜的生長(cháng)溫度是28-30℃,一般使用30℃培養,溫度超過(guò)32℃可能導致細胞的死亡。INVSC1釀酒酵母是生長(cháng)快速的雙倍體酵母細胞,是蛋白表達的理想菌株。INVSC1釀酒酵母是His, Leu, Trp和Ura營(yíng)養缺陷型菌株,在缺乏組氨酸,亮氨酸,色氨酸和尿嘧啶的SC minimal media中無(wú)法生長(cháng)。INVSC1釀酒酵母是非常理想的蛋白表達菌株,但是不應該用于遺傳分析研究,因為該菌株的孢子形成不好。在制作INVSC1釀酒酵母甘油菌的時(shí)候,請不要使用4天以上的平板挑菌保存,盡量使用新鮮的平板。INVSC1的配套載體是pYES3/CT, pYC2, pYES2系列載體。pYES2質(zhì)粒與INVSc1酵母配套使用時(shí),激活pYES2質(zhì)粒的GAL1啟動(dòng)子的轉錄進(jìn)而啟動(dòng)下游重組蛋白的表達。INVSc1為合子型,可直接通過(guò)PEG/LiAc將pYES2質(zhì)粒轉化進(jìn)入INVSc1細胞內。質(zhì)粒pYES2的篩選標志為URA,可用SD-URA板進(jìn)行篩選。INVSC1釀酒酵母可在YPD培養基上生長(cháng),用化轉/電轉化的方法可將質(zhì)粒轉入酵母細胞中,用半乳糖誘導蛋白表達。用30%的甘油與培養物混合可保藏菌種。 |
基因型: | MATa his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52/MATα his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52 |
■ 基本信息
培養基: | YPD/YPDA |
菌株類(lèi)別: | 酵母菌 |
培養條件: | 28-30℃,有氧,YPD/YPDA |
質(zhì)粒轉化: | 化轉/電轉 |
保存方式: | 30%甘油,-80℃ |
基本應用: | 用于蛋白表達 |
■ 使用方法
收到菌液及時(shí)四區劃線(xiàn)活化,挑取單克隆在YPD中培養到生長(cháng)對數中后期加入終濃度30%無(wú)菌甘油保種,分裝置于-80℃保存,避免反復化凍。建議超凈臺內劃線(xiàn)涂板,避免雜菌污染。
■ 注意事項
1. 酵母菌在YPD培養基上會(huì )變粉,是正?,F象,可以由此特性鑒別是否為酵母菌。
2. 酵母菌種化凍1-2次活性下降,不建議直接長(cháng)期保存。
3. 活化保種的種管建議分裝保存,反復凍融菌株活力下降。
4. 本產(chǎn)品僅可用于實(shí)驗室研究,不能用于動(dòng)物,人體以及作為食品添加劑等用途。
5. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。