■ 產(chǎn)品介紹
GS115是畢赤酵母菌株,屬于真核細胞。一般的針對原核生物的抗生素例如卡那和氨芐對酵母是無(wú)效的,因此為了防止大腸桿菌等原核生物對酵母培養菌株污染,往往會(huì )在培養基中加入一些氨芐和卡那霉素的抗生素,來(lái)抑制細菌菌的污染和生長(cháng)。GS115畢赤酵母自身表型為Mut+,但是GS115轉化株既能夠產(chǎn)生出Mut+菌株,也能夠產(chǎn)生出Muts菌株。目的蛋白在這兩種轉化株的表達水平可能是不同的,并且具有不可預測性,所以只有通過(guò)實(shí)驗才能得到最好的酵母表達方案。 畢赤酵母適宜的生長(cháng)溫度是28至30度,溫度超過(guò)32度對蛋白的表達是有害的,并可能導致細胞的死亡。GS115畢赤酵母是是組氨酸缺陷型(His4基因型),如果表達載體上攜帶有組氨酸基因,可補償宿主菌的組氨酸缺陷,因此可以在不含組氨酸的培養基上篩選轉化子。這些受體菌自發(fā)突變?yōu)榻M氨酸野生型的概率一般低于10-8。GS115畢赤酵母可以在YPD培養基中生長(cháng),或者在補充有組氨酸的minimal media中生長(cháng),但是無(wú)法在單獨的minimal media培養基中生長(cháng)。 巴斯德畢赤酵母,是甲醇營(yíng)養型酵母中的一類(lèi)能夠利用甲醇作為唯一碳源和能源的酵母菌。與其它酵母一樣,在無(wú)性生長(cháng)期主要以單倍體形式存在,當環(huán)境營(yíng)養限制時(shí),常誘導2個(gè)生理類(lèi)型不同的接合型單倍體細胞交配,融合成雙倍體。巴斯德畢赤酵母的另一個(gè)生物學(xué)特點(diǎn)是,甲醇代謝所需的醇氧化酶被分選到過(guò)氧化物酶體中,形成區域化。以葡萄糖作碳源時(shí),菌體中只有1個(gè)或很少幾個(gè)小的過(guò)氧化物酶體,而以甲醇作碳源時(shí),過(guò)氧化物酶體幾乎占到整個(gè)細胞體積的80%,AOX增至細胞總蛋白的35%-40%。因此,當在A(yíng)OX基因前利用同源重組方式插入外源蛋白基因時(shí),可獲得大量表達。同時(shí),根據甲醇酵母這種可以形成過(guò)氧化物酶體的特性,既可利用該系統表達一些毒性蛋白和易被降解的酶類(lèi),也可用以研究細胞特異區域化的生物發(fā)生及其機制和功能,為高等動(dòng)物類(lèi)似的研究提供啟示。 |
基因型: | His4(基因型),Mut+(表型) |
■ 基本信息
培養基: | YPD/YPDA |
菌株類(lèi)別: | 酵母菌 |
培養條件: | 28℃,有氧,YPD/YPDA |
質(zhì)粒轉化: | 化轉/電轉 |
保存方式: | 收到后保種,30%甘油,-80℃ |
基本應用: | 用于蛋白表達 |
■ 使用方法
收到菌液及時(shí)四區劃線(xiàn)活化,挑取單克隆在YPD中培養到生長(cháng)對數中后期加入終濃度30%無(wú)菌甘油保種,分裝置于-80℃保存,避免反復化凍。建議超凈臺內劃線(xiàn)涂板,避免雜菌污染。
■ 注意事項
1. 酵母菌在YPD培養基上會(huì )變粉,是正?,F象,可以由此特性鑒別是否為酵母菌。
2. 酵母菌種化凍1-2次活性下降,不建議直接長(cháng)期保存。
3. 活化保種的種管建議分裝保存,反復凍融菌株活力下降。
4. 本產(chǎn)品僅可用于實(shí)驗室研究,不能用于動(dòng)物,人體以及作為食品添加劑等用途。
5. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。