■ 產(chǎn)品介紹
EPI300細胞含有一個(gè)突變的trfA基因,該基因表達出的蛋白產(chǎn)物可以促進(jìn)含有ori V復制子的質(zhì)粒的高拷貝擴繁,誘導劑Ⅰ可以誘導trfA基因的表達。當含有ori V復制子質(zhì)粒的EPI300細胞在LB/2YT或SOB培養基中生長(cháng)時(shí),trfA基因的表達被抑制,ori V復制子質(zhì)粒的拷貝數維持在很低的水平;當在培養基中加入誘導劑Ⅰ,ori V復制子質(zhì)粒的拷貝數可維持在很高的水平,提高了質(zhì)粒產(chǎn)量。因此EPI300菌株可以降低ori V復制子質(zhì)粒的拷貝數,特別適合于各種不穩定 DNA 或毒性基因的克隆。 [mrr-hsdRMS-mcrBC]基因型使EPI300菌株適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA(例如:哺乳動(dòng)物基因組DNA)。recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。lacZΔM15 標記的存在使EPI300可用于藍白斑篩選,rpsL賦予其鏈霉素抗性。 |
基因型: | F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL (StrR) nupG trfA dhfr |
■ 基本信息
抗性: | 硫酸鏈霉素(Str) |
培養基: | LB |
菌株類(lèi)別: | 大腸桿菌 |
培養條件: | 37℃,有氧,LB |
質(zhì)粒轉化: | 42℃熱激 |
保存方式: | 20%甘油,-80℃ |
基本應用: | 用于基因克隆 |
■ 使用方法
建議超凈臺內劃線(xiàn)涂板,得到單克隆后再進(jìn)行其他實(shí)驗操作,避免雜菌污染。
■ 注意事項
1. 本產(chǎn)品僅可用于實(shí)驗室研究,不能用于動(dòng)物,人體以及作為食品添加劑等用途。
2. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。
3. 使用甘油菌時(shí)可不完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂布固體瓊脂平板即可,也可完全融解后使用,但隨著(zhù)凍融次數的增加,菌株的活力會(huì )逐漸下降。