產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
本產(chǎn)品是專(zhuān)用于染料法（SYBR GreenⅠ）實(shí)時(shí)熒光定量PCR 的預混體系。2×濃度，操作簡(jiǎn)單方便；新一代的高效熱啟動(dòng)酶，針對qPCR優(yōu)化的PCR buffer與增強劑，使本產(chǎn)品特異性強，靈敏度高，在寬廣的模板濃度范圍可以得到良好的標準曲線(xiàn)，定量準確，重復性好，可信度高。
適用機型：
ABI Prism 7000/7300/7700/7900, ABI Step One, ABI Step One Plus, ABI 7900HT, ABI 7900HT Fast
三步法熒光定量PCR
步驟 | 溫度 | 時(shí)間 |
|
預變性 | 95℃ | 30 s |
|
變性 | 95℃ | 10 s | 35-40 個(gè)循環(huán) |
退火 | 56-64℃ 1） | 10 s |
延伸 | 72℃ | 30 s 2） |
融解曲線(xiàn)分析 3） |
|
|
|
| 95℃ | 15 s |
|
| 60℃ | 1 min |
|
| 95℃ | 15 s |
|
| 60℃ | 15 s |
|
注意：
1）無(wú)法得到理想的擴增效率時(shí)，適當降低退火溫度；發(fā)生非特異性反應時(shí)，提高退火溫度。
2）對于300bp以?xún)鹊钠?，延伸時(shí)間30s即可，200bp以?xún)鹊钠?，延伸時(shí)間20s即可。
3）本說(shuō)明是以ABI 7500熒光定量PCR儀為參照設定，融解曲線(xiàn)分析請以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進(jìn)行設定。
