產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
SD+缺陷型氨基酸混合物是由Minimal SD Base與缺陷氨基酸混合物混合而成,如SD/-His Broth即Minimal SD Base混合了DO Supplement-His。用做篩選培養基,用于選擇培養含有特異載體的酵母或進(jìn)行雜交篩選。又如,SD/-Leu Broth,SD/-Trp Broth分別用于篩選bait和prey載體(bait和prey載體帶有合成色氨酸和亮氨酸的基因)。攜帶這兩個(gè)載體的酵母細胞可以在雙缺篩選培養基SD/-Leu/-Trp生長(cháng),而不含有這兩個(gè)基因的親代酵母菌株(如Y2H Gold)不能生長(cháng)。
使用方法:(新配方不用調節PH值)
(1). 在500ml去離子水中加入1袋(0.5L規格)SD +缺陷型氨基酸混合物,攪拌溶解。
(2). 121℃高壓滅菌15分鐘。
(3). 4℃冰箱避光儲存已經(jīng)滅菌的液體培養基。
注意事項:
1.GAL1啟動(dòng)子誘導表達要選用Minimal SD Agar Base Gal/Raf培養基。
2.在配制酵母缺陷培養基時(shí),培養基會(huì )變色,由淺黃到深褐色不等,對酵母的生長(cháng)不會(huì )產(chǎn)生嚴重影響。
3.Minima SD Agar Base Gal/Raf培養基高溫高壓下可能對誘導效果產(chǎn)生抑止,尤其是在做表達調節介導的功能互補實(shí)驗需特別注意!
● 如果需要制備固體平板,可購買(mǎi)相關(guān)SD +缺陷型氨基酸混合物 with Agar試劑;
或者配置時(shí)自行添加Agar,務(wù)必選用優(yōu)質(zhì)Agar,添加量為20 g/L。冷卻到50℃把培養基倒入平板中,室溫使其凝固。封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱。
● 為什么我做的平板不凝?
自行添加Agar,務(wù)必選用優(yōu)質(zhì)Agar,添加量為20 g/L。固體培養基不凝固可能是由于pH值偏低或者滅菌時(shí)間過(guò)長(cháng)(也會(huì )降低pH值);水質(zhì)偏酸也會(huì )使得培養基偏酸,建議滅菌前調整SD系列培養基的pH至5.8。121℃,高壓滅菌15min,及時(shí)從滅菌鍋內取出培養基。