產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
DO Supplement(Dropout Supplement),是由必需氨基酸和兩種核苷酸組成的混合物,用于制備 SD 培養基(synthetic dropout medium—由YNB(無(wú)氨基酸)、葡萄糖、氨基酸和核苷酸分子配制而成)。任何一種DO Supplement都缺失一種或多種成分,借此來(lái)篩選可以表達該成分的菌株或用來(lái)激活相關(guān)報告基因。
DO Supplement(缺陷氨基酸混合物)系列為即用型粉劑,不能單獨使用,需配合Minimal SD Base培養基,或YNB(無(wú)氨基酸)、葡萄糖配置成SD缺陷培養基使用。
使用方法:
1、SD配置
(1)①按照標簽稱(chēng)取DO Supplement(約1.3g,具體參考產(chǎn)品標簽)加入1L去離子水中,再加入26.7g Minimal SD Base
或
②按照標簽稱(chēng)取DO Supplement(約1.3g,具體參考產(chǎn)品標簽)加入1L去離子水中,然后分別加入 6.7g YNB、20g葡萄糖
(2)攪拌溶解,調節 pH 至 5.8。
(3)121℃高壓滅菌 15min,室溫冷卻后使用,或4℃冰箱避光儲存已經(jīng)滅菌的液體培養基。
或者
1. 在900ml 去離子水中加入1.3g 的DO 培養基,然后再加入6.7g YNB,攪拌溶解;
2. 無(wú)需調節pH,121℃高壓滅菌15min;
3. 4℃冰箱避光儲存已經(jīng)滅菌的液體培養基;
4. 使用時(shí)再加入100ml 已滅菌的20%葡萄糖。
2、SD Agar配置
(1)①按照標簽稱(chēng)取DO Supplement(約1.3g,具體參考產(chǎn)品標簽)加入1L去離子水中,再加入46.7g Minimal SD Agar Base
或
②按照標簽稱(chēng)取DO Supplement(約1.3g,具體參考產(chǎn)品標簽)加入1L去離子水中,然后分別加入 6.7g YNB、20g葡萄糖,20g瓊脂粉。
(2)攪拌溶解,調節 pH 至 5.8。
(3)121℃高壓滅菌15min,冷卻到50-60℃,把培養基倒入平板中,室溫使其凝固后使用,或封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱。
注意事項:
1. 在配制酵母SD缺陷培養基時(shí),葡萄糖在滅菌時(shí)會(huì )有炭化變色現象,培養基由淺黃到深褐色不等,對釀酒酵母的生長(cháng)不會(huì )產(chǎn)生嚴重影響。
2. 葡萄糖高溫滅菌會(huì )有碳化現象,可使用115℃滅菌15-20min,或滅菌后及時(shí)取出,控制好滅菌溫度和時(shí)間,以減緩碳化變色。
3. DO和SC培養基均不含葡萄糖,如有特殊要求(如畢赤酵母)可將20%葡萄糖單獨滅菌,待使用時(shí)再加入。
4. 酵母SD 缺陷培養基的pH 值在5.5-6.5 范圍內都是比較適合酵母生長(cháng)的,本公司缺陷培養基pH已經(jīng)過(guò)調試,使用時(shí)只需要稍微調整即可。
5. 本產(chǎn)品成分比較復雜,多為易吸潮的成分,稱(chēng)取完后已及時(shí)旋緊瓶蓋,并置于干燥避光處儲存。嚴重結塊后請停止使用。