■ 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
λ噬菌體載體廣泛用于文庫篩選,目的克隆培養獲得大量的噬菌體顆粒需要提取λ噬菌體DNA來(lái)開(kāi)展測序等后續工作。λ噬菌體裂解培養物離心后的上清,首先用RNase A /DNase I混合酶消化去除殘留的宿主菌DNA/RNA,沉淀收集噬菌體,噬菌體被SDS裂解,殘留碎片通過(guò)沉淀離心去除掉。裂解物上清中的λ噬菌體DNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內硅基質(zhì)膜,再通過(guò)一系列快速的漂洗-離心的步驟,將鹽、細胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,最后低鹽的洗脫緩沖液將λ噬菌體DNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。
■ 產(chǎn)品特點(diǎn)
1.不需要使用有毒的苯酚等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟。
2.節省時(shí)間,簡(jiǎn)捷,可用于液體培養裂解物和固體培養板的提取,單個(gè)樣品操作一般可在1.5小時(shí)內完成。
3.產(chǎn)量高,典型的產(chǎn)量10ml λ噬菌體裂解培養物上清可以提取約10μg λ噬菌體DNA。
4.多次柱漂洗確保高純度,OD260/OD280典型的比值達1.7~1.9??梢灾苯佑脕?lái)酶切和測序。
■ 儲存事項
在RNase A管和DNase I管分別加入1毫升的裂解緩沖液吹打,顛倒混勻,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分裝-20℃凍存,有效期6個(gè)月。