EBY100菌株是Invitrogen公司開(kāi)發(fā)的酵母展示用菌株，MATa型，與pYD1質(zhì)粒配套使用，可直接轉化質(zhì)粒進(jìn)行蛋白展示試驗；Transformation marker為：leu2，trp1。EBY100-pYD1酵母展示系統通過(guò)釀酒酵母的a凝集素受體（a-agglutinin receptor）將目標蛋白展示在細胞表面，方便后期篩選。其基本原理為：a凝集素受體由AGA1和AGA2兩個(gè)亞基組成，AGA1蛋白(725個(gè)氨基酸)由EBY100細胞合成，分泌到細胞外，在細胞外基質(zhì)中與酵母細胞壁的β-葡聚糖共價(jià)結合，AGA2蛋白(69個(gè)氨基酸)可以通過(guò)兩個(gè)二硫鍵結合到AGA1蛋白上；將目標蛋白構建到pYD1質(zhì)粒上，與AGA2蛋白融合表達，AGA2蛋白在N端，目標蛋白在C端，當含有pYD1質(zhì)粒的 EBY100 酵母菌在含有半乳糖，同時(shí)不含葡萄糖的培養基中誘導表達時(shí)可以表達出AGA2-target protein 融合蛋白，該融合蛋白通過(guò)AGA2結合到EBY100酵母細胞表面的AGA1蛋白上進(jìn)而將目標蛋白展示在酵母表面。EBY100感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，-80℃可保存三個(gè)月，pGADT7質(zhì)粒檢測轉化效率>104cfu/μg DNA。
基 因 型：MATa AGA1::GAL1-AGA1::URA3 ura3-52 trp1 leu2-delta200 his3-delta200 pep4::HIS3 prbd1.6R can1 GAL
