■ 產(chǎn)品簡(jiǎn)介

零背景ZT4-Blunt克隆試劑盒是專(zhuān)門(mén)對平滑末端DNA片段或PCR擴增產(chǎn)物進(jìn)行高效克隆的一種陽(yáng)性篩選系統。該克隆載體包含一個(gè)致死基因，當目的DNA片段插入克隆位點(diǎn)時(shí),該致死基因被破壞，故僅帶插入目的片段的克隆才能生長(cháng)形成白色菌落，無(wú)需加入IPTG及X-Gal進(jìn)行藍白斑篩選；克隆陽(yáng)性率超過(guò)95%。

■ 產(chǎn)品亮點(diǎn)

·可5min快速連接，且克隆效率超過(guò)95%

·無(wú)需IPTG及X-Gal進(jìn)行藍白斑篩選

·PCR擴增產(chǎn)物無(wú)需磷酸化

·酶切產(chǎn)物無(wú)需去磷酸化

·專(zhuān)用于平滑末端DNA片段或PCR擴增產(chǎn)物

·特別適合Pfu、KOD等系列產(chǎn)物的克隆

1.制備片段

	★平端片段（Pfu、KOD等擴增產(chǎn)物）
	★片段濃度最低可至5ng/μL

2.與載體混合加入連接酶

	★實(shí)現5min快連
	★最長(cháng)可連接10kb片段（即使5kb片段，也已超過(guò)95%的陽(yáng)性率）
	★載體穩定性極高，反復凍融影響極低

3.轉化

	★采用先進(jìn)的自殺基因篩選技術(shù)無(wú)需繁瑣藍白斑篩選，陽(yáng)性克隆率接近100%

■ 菌落PCR

■ 儲存

-20℃下至少保存1年。

■ ZT4-Blunt載體測序引物序列

Forward Sequencing Primer，20-mer：5’-TAATACGACTCACTATAGGG-3’

Reverse Sequencing Primer，24-mer：5’-AAGAACATCGATTTTCCATGGCAG-3’

■ ZT4-Blunt載體圖譜

■ ZT4-Blunt載體多克隆位點(diǎn)序列